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如何操作大鼠胱抑素C试剂盒及使用注意事项
  今天给大家分享一下如何操作大鼠胱抑素C试剂盒及使用注意事项,话不多说下面让我们一起来了解一下吧。
 
  一、双抗体夹心法(检测未知抗原)
 
  二、间接法(检测未知抗体)
 
  1、用缓冲液将抗体稀释至1-10ug/ml。在反应孔中加0.1ml,4℃ 过夜。次日,弃去孔内溶液,用洗涤缓冲液洗3次。
 
  2、加样:加一定稀释的待检样品0.05ml于上述已包被之反应孔中,置37℃ 孵育1小时。然后洗涤(同时做空白孔,阴性对照孔及阳性对照孔)。
 
  3、加酶标抗体:于各反应孔中,加入新鲜稀释的酶标抗体(经滴定后的稀释度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小时,洗涤。
 
  4、加底物液显色:于各反应孔中加入临时配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分钟。
 
  5、终止反应:于各反应孔中加入2M硫酸0.05ml
 
  6、结果判定:可于白色背景上,直接用肉眼观察结果:反应孔内颜色越深,阳性程度越强,阴性反应为无色或极浅,依据所呈颜色的深浅,以“+”、“-”号表示。也可测OD值:在ELISA检测仪上,于450nm(若以ABTS显色,则410nm)处,以空白对照孔调零后测各孔OD值,若大于规定的阴性对照OD值的2.1倍,即为阳性。
 
  大鼠胱抑素(Cys)elisa试剂盒注意事项
 
  1. 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
 
  2.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  3.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第①孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
 
  4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
 
  5.底物请避光保存。
 
  6.严格按照大鼠胱抑素(Cys)elisa试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
 
  7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
 
  8.本试剂不同批号组分不得混用。
 
  10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
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